LAPORAN LENGKAP PRAKTIKUM
BIOKIMIA
(ENZIM DAN KERJA ENZIM)
Disusun oleh:
NAMA : LASINRANG ADITIA
NIM : 60300112034
KELAS : BIOLOGI A
KELOMPOK : IV (Empat)
LABORATORIUM BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI ALAUDDIN MAKASSAR
2013
LEMBAR PENGESAHAN
Laporan lengkap
praktikum Biokimia dengan judul “Enzim dan Kerja Enzim” yang disusun
oleh:
Nama : Lasinrang Aditia
Nim : 60300112034
Kelas : Biologi A
Kelmpok : IV (empat)
Telah diperiksa oleh
Kordinator Asisten / Asisten dan dinyatakan diterima.
Samata-Gowa, 30 Desember 2013
Kordinator Asisten Asisten
(Ika Dian Rostika)
(Fifi Dismayanti)
60300111021 60300111011
Mengetahui,
Dosen Penanggung Jawab
(Eka Sukmawati S.Si, M.Si)
A. Tujuan
Praktikum
Adapun
tujuan dilakukannya praktikum ini yaitu sebagai berikut:
1. Untuk
membuktikan bahwa dalam air ludah terdapat enzim.
2. Untuk
membuktikan kerja enzim itu spesifik.
3. Untuk
mengetahui pengaruh suhu terhadap aktivitas enzim.
B. Dasar
Teori
Enzim
merupakan substansi penting dalam setiap reaksi kimia dalam sel. Orang yang
pertama menemukan enzim adalah Edward dan Hans Buchner. Oleh karena enzim dapat
mempercepat reaksi kimia, berarti enzim merupakan rekasi katalis. Enzim
merupakan katalisator organik dan dibuat dalam sel makhluk hidup sehingga enzim
disebut juga biokatalisator. Enzim juga memiliki sifat diantaranya, selektif,
karena enzim hanya dapat bekerja pada substrat tertentu (Cartono, 2004).
Fungsi suatu enzim ialah sebagai
katalis untuk proses biokimia yang terjadi dalam sel maupun luar sel. Suatu
enzim dapat mempercepat reaksi 10-11 kali lebih cepat daripada apabila reaksi tersebut dilakukan tanpa
katalis. Berfungsi sebagai katalis yang sangat efisien, disamping itu mempunyai
derajat kekhasan yang tinggi. Enzim dapat
menurunkan energi aktivasi suatu reaksi kimia. Reaksi kimia ada yang membutuhkan energi (reaksi endergonik) dan adapula yang menghasilkan energi/mengeluarkan energi (eksergonik) (Poedjiadi, 1994).
Proses (reaksi kimia) yang
berlangsung dengan baik dalam tubuh dimungkinkan karena adanya katalis
yang disebut enzim. Berzelius
(1837) mengusulkan nama “katalis” untuk zat-zat yang dapat mempercepat reaksi
tetapi zat itu sendiri tidak ikut bereaksi. Proses kimia yang terjadi dengan pertolongan enzim telah dikenal sejak
zaman dahulu misalnya pembuatan anggur dengan cara fermentasi atau peragian. Demikian pula pembuatan asam cuka termasuk proses kimia berdasarkan
aktifitas enzim. Dahulu proses fermentasi (Pasteur) dianggap hanya terjadi
dengan adanya sel yang mengandung enzim. Anggapan tersebut berubah setelah
Buchner membuktikan bahwa cairan yang berasal dari ragi tanpa adanya sel hidup
dapat menyebabkan fermentasi gula menjadi alkohol dan karbondioksida. Hingga sekarang kata ‘enzim’ yang berarti ‘didalam ragi’ tetap dipakai
untuk nama katalis dalam proses biokimia. Enzim dikenal untuk pertama kalinya sebagai protein oleh Sumner pada tahun
1926 yang telah berhasil mengisolasi urease dari ‘kata pedang’ (jack bean). Urease adalah enzim yang dapat menguaraikan urea menjadi CO2 dan
NH3. Beberapa tahun kemudian Notrhrop
dan Kunitz dapat mengisolasi pepsin, tripsin, kimotripsin. Selanjutnya
makin banyak enzim yang telah dapat diisolasi dan telah dibuktikan bahwa enzim tersebut
adalah suatu protein (Poedjiadi, 1994).
Ada
beberapa faktor yag mempengaruhi enzim yaitu, pengaruh suhu dimana suhu optimum
untuk dapat mengurangi aktivitas enzim sedangkan diatas suhu optimum maka dapat
menyebabksan denaturasi pada enzim dan mematikan kerja enzim. Pengaruh pH
optimum yang khas. pH akan mengalami denaturasi jika pH jauh di atas pH
optimum. Konsentrasi enzim pada konsentrasi substrat tertentu, bertambahnya
konsentrasi enzim akan meningkatkan kecepatan kerja reaksi enzim. Dengan kata
lain konsentrasi enzim berbanding lurus terhadap kerja enzim. Konsentrasi
substrat pada konsentrasi enzim tetap, peningkatan konsentrasi substrat akan
menaikkan kecepatan reaksi enzimatis sampai mencapai kecepatan maksimum
(Sutresna, 2007).
C. Metode
Praktikum
1. Waktu dan
Tempat
Adapun waktu dan tempat dilakukannya
praktikum ini adalah:
Hari/tanggal : Selasa/24 Desember
2013
Waktu : 13.00-15.00 WITA
Tempat : Laboraturium
Mikrobiologi Lantai II
Fakultas
Sains dan Teknologi
Universitas
Islam Negeri Alauddin Makassar
Samata-Gowa
2. Alat dan
Bahan
a. Alat
Adapun alat yang digunakan pada percobaan ini
yaitu tabung reaksi, gelas kimia, sikat tabung, pembakar bunsen, korek api, termometer,
kertas saring, penjepit tabung dan pipet tetes.
b. Bahan
Adapun
bahan yang digunakan pada percobaan ini yaitu filtrat air ludah/Saliva, es
batu, larutan amilum (telur), larutan biuret, larutan iodium, dan larutan
benedict.
3. Cara
Kerja
1. Percobaan
mucin
a. Mengambil
1 ml filtrat air ludah yang telah tersaring.
b. Melakukuan
percobaan biuret dengan cara memberi 1 ml larutan biuret pada filtrat air ludah
dan mengamati perubahan warna yang terjadi.
c. Mencatat
hasil pengamatan.
2. Percobaan
hidrolisis amilum oleh enzim amilase.
a. Mengisi
tabung reaksi dengan larutan benedict masing-masing 2 ml.
b. Memasukan
air liur kedalam tabung berisi benedict
c. Mengocok
selama 2 menit
d. Mengamati
perubahan warna yang terjadi dan Mencatat hasil pengamatan.
e. Melakukan
hal yang sama dengan latutan iodium.
3. Percobaan
pengaruh suhu terhadap efektivitas enzim
a. Menyiapkan
5 buah tabung reaksi dan mengisi masing-masing dengan larutan amilum.
b. Menambahkan
1 ml enzim amilase pada tiap tabung.
c. Memasukan
tabung 1 pada gelas kimia berisi air es, menyimpan tabung 2 pada suhu kamar,
memasukan tabung 3 pada pemanas dengan suhu 37-40oC, memasukan
tabung 4 pada pemanas dengan suhu 75-80oC, dan tabung ke 5 pada suhu
100 oC dan mendiamkan larutan selama 15 menit.
d. Menguji
dengan larutan iodium dan menguji pula dengan larutan benedict.
e. Mengamati
perubahan warna yang terjadi dan mencatat hasil pengamatan.
D. Hasil dan Pembahasan
1. Hasil
Pengamatan
Adapun hasil
pengamatan yang diperoleh yaitu:
a. Percobaan mucin
|
No.
|
Bahan
|
Reaksi
|
Keterangan warna
|
|
|
+
|
-
|
|||
|
1
|
Filtrat air ludah (Saliva)
|
|
ü
|
Biru
|
b. Hidrolisis
amilum oleh amilase
|
No.
|
Bahan
|
Reaksi
|
Keterangan warna
|
|
|
+
|
-
|
|||
|
1
|
Tabung I (Iodium)
|
|
ü
|
Coklat
|
|
2
|
Tabung II (benedict)
|
|
ü
|
|
c. Pengaruh
suhu terhadap efektivitas enzim
|
No
|
Suhu (0C)
|
Perubahan Warna
|
|
|
Uji iodium
|
Uji iodium
|
||
|
1
|
0
|
Bening
|
Biru
|
|
2
|
25 –
30
|
Bening
|
Biru
|
|
3
|
37
– 40
|
Bening
|
Biru
|
|
4
|
75
– 80
|
Coklat
|
Biru tua
|
|
5
|
100
|
Bening
|
Biru keunguan
|
2.
Pembahasan
Enzim merupakan substansi penting dalam setiap reaksi kimia dalam sel. Oleh
karena enzim dapat mempercepat reaksi kimia, berarti enzim merupakan rekasi
katalis. Enzim merupakan katalisator organik dan dibuat dalam sel makhluk hidup
sehingga enzim disebut juga biokatalisator. Enzim juga memiliki sifat
diantaranya, selektif, karena enzim hanya dapat bekerja pada substrat tertentu.
Fungsi suatu enzim ialah sebagai katalis untuk proses biokimia yang terjadi
dalam sel maupun luar sel. Suatu enzim dapat mempercepat reaksi 10 sampai 11
kali lebih cepat daripada apabila reaksi tersebut dilakukan tanpa katalis.
Berfungsi sebagai katalis yang sangat efisien, disamping itu mempunyai derajat
kekhasan yang tinggi.
Adapun pembahasan yang diperoleh pada pengamatan ini yaitu:
a. Percobaan
Mucin
Mucin merupakan protein atau enzim yang diproduksi oleh sel-sel epitel,
atau jaringan yang melapisi rongga tubuh. Karakteristik mucin adalah
kemampuannya untuk membentuk gel. Mucin berfungsi sebagai pelumas untuk
menghambat molekul yang akan memasuki sel. Mucin kebanyakan diproduksi sebagai
komponen air liur. Percobaan ini bertujuan untuk membuktikan adanya mucin dalam
saliva (air ludah).
Pada percobaan ini digunakan filtrat air ludah sehingga menghasilkan enzim
amilase yang terkandung di dalamnya. Setelah filtrat tersebut tersedia maka
untuk menguji ditambahkan dengan larutan biuret. Untuk mendapatkan reaksi positif maka akan terbentuk larutan yang
berwarna ungu karena adanya larutan peptida yang terkandung. Tetapi pada hasil
percobaan yang telah dilakukan memperlihatkan reaksi yang negatif dengan terbentuknya
larutan yang berwarna biru. Hal ini terjadi mungkin saja karena larutan
biuretnya yang sudah tak dapat berfungsi dengan baik ataukah sampel air ludah
yang tidak tepat karena dalam pengambilan sampel bisa saja sembarang meludah
dalam hal ini bukan air liur.
b. Percobaan
hidrolisis amilum oleh enzim amilase
Hasil percobaaan yang telah dilakukan maka dapat dilihat bahwa hasil yang
diperoleh dari filtrat air ludah yang ditambahkan amilum dan benedict hasilnya
negatif dan menghasilkan warna bening. Hal ini disebabkan karena benedict yang
digunakan tidak mampu menyerap enzim amilase yang diujikan. Pada percobaan air
ludah yang ditambahkan amilum dan larutan iodium yang hasilnya negatif. Hal ini
terjadi dikarenakan iodium tidak diserap ke dalam aliran spiral amilase
sehingga terjadi perubahan warna menjadi cokelat yang menandakan bahwa reaksi
ini negatif.
c. Pengaruh
suhu terhadap aktivitas enzim
Enzim adalah biokatalis sehingg tidak ikut bereaksi dengan zat dan produk
yang dihasilkan. Jadi jika larutan tidak bercampur berarti enzim tersebut masih
aktif meskipun agak rusak namun masih bias menghidolisis produk. Enzim di bawah
suhu optimum dapat mengurangi aktivitas yang terjadi pada enzim sedangkan di
atas suhu optimum maka dapat menyebabkan denaturasi pada enzim dan mematikan
kerja enzim. Semakin tunggi suhu, kerja enzim juga akan meningkat. Pada umumnya
enzim akan bekerja baik pada suhu optimum, yaitu antara 300–400C.
Enzim dapat bereaksi dengan baik pada suhu 300–400C dan
dapat bereaksi lebih cepat pada suhu lebih dari 500C. Namun pada
suhu antara 600–700C, reaksi enzim menurun.
Pada pengamatan yang dilakukan terlihat pada tabung I yang disimpan di
gelas kimia yang berisikan dengan es (00C)
perubahan warna terjadi pada uji benedict dengan bercampurnya larutan dan
adanya perubahan warna dari bening menjadi biru. Sedangkan pada uji iod larutan
tidak dapat bercampur karena enzim yang ada dalam keadaan suhu yang rendah dan
tidak terjadi proses hidrolisis pada reagen amilum sehingga tidak terjadi
perubahan warna yaitu tetap bening.
Pada tabung II yang disimpan pada suhu kamar kenaikan suhu lingkungan akan
meningkatkan energi kinetik enzim dan frekuensi tumbukan antara molekul enzim
dan substrat yang menyebabkan keaktifan pada enzim sehingga amilum dapat
terhidrolisis sehingga terjadi perubahan warna pada uji benedict yaitu dari
bening menjadi biru sedangkan pada uji iodium tidak mengalami perubahan warna
yaitu tetap bening karena amilum tidak dapat terhidrolisis.
Pada tabung III yang dimasukkan ke genangan air yang memiki suhu 370-400C terjadi perubahan warna pada uji benedict
yaitu dari bening menjadi biru yang disebabkan enzim memiliki suhu optimal 300-400C sehingga pada suhu ini aktivitas enzim
berjalan baik sehingga dapat menghidrolisis amilum sedangkan pada uji iodium
tidak terjadi perubahan warna yaitu tetap warna bening karena karena tidak
iodium tidak dapat menhidrolisis amilum pada suhu ini.
Pada tabung IV dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi air bersuhu 750-800C
dimana kedua uji ini terjadi perubahan warna menjadi coklat untuk uji iodium
dan biru tua untuk uji benedict karena enzim mengalami denaturasi yang
menaikkan kecepatan reaksi.
Pada tabung V yang dimasukkan ke dalam tabung berisi air mendidih (1000C)
diamana perubahan warna yang terjadi hanya pada uji benedict dimana terjadi
perubahan warna menjadi biru keunguan sedangkan pada uji iodium warnanya tetap
bening. Larutan iodin yang di gunakan berfungsi sebagai indikator terhadap
proses terjadinya reaksi yang di tandai dengan adanya perubahan warna.
Sedangkan uji benedict menunjukan kerja enzim degan adanya perubahan warna. Dapat
disimpulkan pada hasil pengamatan dimana pengaruh suhu terhadap aktivitas enzim
bahwa saliva tidak steril saat direaksikan dengan reagen iodium yang
menghasilkan warna bening karena adanya kandungan pati di dalamnya dan uji
benedict mengandung gula pereduksi yang memberikan warna biru keunguan.
E.
Kesimpulan
Adapun kesimpulan yang
diperoleh setelah dilakukannya percobaan ini yatitu sebagai berikut:
1. Dalam
air ludah terdapat enzim yang berperan dalam pencernaan makanan yaitu enzim amilase
dan maltose.
2. Enzim
bersifat spesifik karena hanya bekerja pada substrat tertentu saja jadi satu
enzim hanya berlaku untuk satu substrat saja.
3. Enzim
bekerja di bawah suhu
optimum dapat mengurangi aktivitas yang terjadi pada enzim tersebut, sedangkan
enzim yang bekerja di atas suhu optimum maka dapat menyebabkan denaturasi pada
enzim tersebut dan mematikan kerja enzim. Semakin tunggi suhu, kerja enzim juga
akan meningkat. Pada umumnya enzim akan bekerja baik pada suhu optimum, yaitu
antara 300–400C. Enzim dapat bereaksi dengan baik pada
suhu 300–400C dan dapat bereaksi lebih cepat pada suhu
lebih dari 500C. Namun pada suhu antara 600–700C,
reaksi enzim menurun.
DAFTAR PUSTAKA
Cartono. Biologi Umum. Bandung: Prisma Press, 2004.
Poedjiadi, Anna. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: UI-Press, 1994.
Sutresna, Nana. Kimia. Bandung: Grafindo, 2007.
No comments:
Post a Comment